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        產品詳情
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        • 產品名稱:NRL2

        • 產品型號:
        • 產品廠商:佰曄生物
        • 產品文檔:
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        簡單介紹:
        NRL2
        詳情介紹:

        黑化大家鼠肺成纖維細胞產品基本信息

        細胞名稱: NRL2, 黑化大家鼠肺成纖維細胞
        細胞又名: NRm
        種屬來源: 大鼠
        組織來源:
        細胞形態: 成纖維細胞樣
        生長特性: 貼壁生長
        培養基: 90%DMEM培養液(內含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清
        生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃, 
        傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
        凍存條件: 90% 完全培養基+10% FBS,液氮儲存
        支原體檢測: 陰性
        應用: 該細胞可以作為轉染宿主細胞。
        細胞鑒定:
        免疫組化顯示波形蛋白(Vimentin)抗體陰性;結蛋白(Desmin)抗體陽性。

        NRL2黑化大家鼠肺成纖維細胞接受后處理

        1)  收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
         
        2)  請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
         
        3)  棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的完全培養基。
         
        4)  如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
         
        5)  接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
         

        NRL2黑化大家鼠肺成纖維細胞培養操作

        1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。
         
        2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
         
             1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
         
             2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消 化。
             
             3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
         
             4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
         
        3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
         
              1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
         
              2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍存管做好標識。
         
             3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

        NRL2黑化大家鼠肺成纖維細胞培養注意事項

        1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及時和我們聯系。
         
        2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔。
         
        3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下 照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
         
        4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養,待細 胞匯合度  80%左右時正常傳代。
         
        5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞 傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
         
        6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和 Procell 技術 部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯 系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
         
        7. 該細胞僅供科研使用。



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        黑化大家鼠肺成纖維細胞產品應用舉例

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