| 出品公司: | ATCC |
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| 細胞名稱: | NCl-H460細胞, ATCC HTB-177細胞, H460細胞, 人大細胞肺癌細胞 |
| 細胞又名: | NCI.H460; H460; H-460; NCIH460; NCI-HUT-460; NCI-460 |
| 存儲人: | AF Gazdar, JD Minna |
| 種屬來源: | 人 |
| 組織來源: | 肺 |
| 疾病特征: | 肋膜滲出癌；大細胞肺癌 |
| 細胞形態: | 上皮細胞樣 |
| 生長特性: | 貼壁生長 |
| 培養基: | RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022)，90%；FBS，10%。 |
| 產品目錄號: | HTB-177 |
| 生長條件: | 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃, |
| 傳代方法: | 1：2至1：6，每周2次。 |
| 凍存條件: | 90% 完全培養基+10% DMSO，液氮儲存 |
| 支原體檢測: | 陰性 |
| **等級: | 1 |
| STR: |
Amelogenin: X,Y
CSF1PO: 11,12
D13S317: 13
D16S539: 9
D5S818: 9,10
D7S820: 9,12
THO1: 9.3
TPOX: 8
vWA: 17
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| 同工酶: |
AK-1, 1
ES-D, 1
G6PD, B
GLO-I, 1-2
Me-2, 1
PGM1, 1
PGM3, 1
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| 參考文獻: |
Banks-Schlegel SP, et al. Intermediate filament and cross-linked envelope expression in human lung tumor cell lines. Cancer Res. 45: 1187-1197, 1985. PubMed: 2578876
Takahashi T, et al. p53: A frequent target for genetic abnormalities in lung cancer. Science 246: 491-494, 1989. PubMed: 2554494
Brower M, et al. Growth of cell lines and clinical specimens of human non-small cell lung cancer in a serum-free defined medium. Cancer Res. 46: 798-806, 1986. PubMed: 3940644
Geiger T, et al. Antitumor activity of a PKC-alpha antisense oligonucleotide in combination with standard chemotherapeutic agents against various human tumors transplanted into nude mice. Anticancer Drug Des. 13: 35-45, 1998. PubMed: 9474241
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| 細胞圖片： |
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NCl-H460細胞ATCC HTB-177人大細胞肺癌細胞特點和簡介
NCI-H460細胞株從一位大細胞肺癌患者的胸水中建立。 細胞表達的p53 mRNA易于檢測，其水平與正常肺細胞相當，未表現出DNA總體結構異常。 角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性，神經絲三聯體蛋白陰性。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。NCl-H460細胞ATCC HTB-177人大細胞肺癌細胞接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發給我們。2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養基，添加 6ml本公司附帶的完全培養基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
NCl-H460細胞ATCC HTB-177人大細胞肺癌細胞培養操作
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
NCl-H460細胞ATCC HTB-177人大細胞肺癌細胞培養注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。